產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST
優(yōu)化小鼠ELISA試劑盒的靈敏度可以通過(guò)以下幾個(gè)方面來(lái)實(shí)現(xiàn):
試劑與抗體優(yōu)化
1、?包被條件
抗原/抗體濃度需通過(guò)棋盤(pán)滴定法確定zuijia包被量(通常1-10μg/mL),過(guò)高可能導(dǎo)致非特異性結(jié)合。
包被緩沖液優(yōu)先選擇碳酸鹽緩沖液(pH 9.6),4℃過(guò)夜孵育可提高結(jié)合效率。
2、?封閉劑選擇
推薦5%脫脂奶粉或1% BSA封閉,若背景高可嘗試0.8%明膠替代。
封閉時(shí)間需≥1小時(shí),確保孔底游離位點(diǎn)飽和。?
樣本與操作優(yōu)化
?樣本處理
血清/血漿避免溶血,組織樣本需充分勻漿并離心去沉淀。
稀釋液建議含0.05% Tween-20的PBS,減少非特異性吸附。
?孵育與洗滌
酶標(biāo)抗體孵育時(shí)間控制在30-60分鐘,37℃恒溫避免溫度波動(dòng)。
洗滌液需含0.05% Tween-20,每次洗滌≥350μL,重復(fù)5次以降低背景。
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靈敏度驗(yàn)證
?標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)優(yōu)化
標(biāo)準(zhǔn)品需覆蓋預(yù)期樣本濃度范圍,線(xiàn)性回歸R2≥0.99。
低濃度點(diǎn)(如7.81 pg/mL)需重復(fù)檢測(cè),確保LoD符合說(shuō)明書(shū)標(biāo)注。
?信噪比控制
空白孔OD值應(yīng)≤0.1(夾心法),陽(yáng)性信號(hào)與陰性對(duì)照比值≥20。
操作規(guī)范要點(diǎn)
1、試劑管理:不同批號(hào)試劑禁止交叉混用,避免因工藝差異導(dǎo)致靈敏度波動(dòng)
2、質(zhì)量控制:每批次實(shí)驗(yàn)需做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)驗(yàn)證,確保zuidi檢測(cè)限符合說(shuō)明書(shū)要求(如雌二醇試劑盒≤12pg/mL)。
3、干擾排除:溶血或高血脂樣本需預(yù)處理(如離心過(guò)濾),避免假陰性結(jié)果。
技術(shù)升級(jí)
選用高敏試劑盒(如Elabscience迭代產(chǎn)品,靈敏度提升25倍)。
雙抗體夾心法優(yōu)先于競(jìng)爭(zhēng)法,尤其適用于大分子檢測(cè)。?
通過(guò)上述措施,可以有效提升小鼠ELISA試劑盒的靈敏度,獲得更準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果。?